Исследование отделяемого женских половых органов

Приготовление препаратов . Материал наносят на чистые обезжиренные предметные стёкла тонким равномерным слоем, высушивают на воздухе.

Окраска. Препарат фиксируют 3 минуты в 96° этиловом спирте, высушивают и наносят на 1 мин 1% раствор метиленового синего, после чего тщательно смывают оставшийся краситель водой и высушивают в штативе.

Микроскопия . Исследование проводят с естественным или искусственным освещением (объектив 90 х иммерсионный, окуляр 7 х или 10 х; иммерсионное масло - кедровое).

Ядра клеток окрашены в синий цвет, протоплазма - в голубой различной интенсивности. Гонококки темно - синего цвета, резко очерчены, бобовидной формы, парные; располагаются внутриклеточно, в слизи и на эпителиоцитах.

Влагалищные трихомонады отличаются полиморфизмом (округлые, овальные, полигональные), расположены в слизи, между клеточными элементами; у них четко видна оболочка; ядро расположено эксцентрично и интенсивно окрашено в синий цвет, цитоплазма нежная, сетчатая, светло - синяя; вакуоли бесцветны.

Обнаружение гонококков и влагалищных трихомонад в исследуемом материале, окрашенном эозином и метиленовым синим.

Реактивы.1 .1% раствор эозина в этиловом спирте.

2.1% водный раствор метиленового синего.

Окраска. Без предварительной фиксации препараты погружают на 10 - 15 с в 1% раствор эозина, смывают струёй водопроводной воды и заливают 1% раствором метиленового синего на 1 - 2 мин, затем тщательно смывают оставшийся краситель водой, и высушивают в штативе.

Окраска этим методом предусматривает выявление, наряду с гонококками и влагалищными трихомонадами и эозинофильных гранулоцитов.

Микроскопия. Препарат синего цвета: ядра клеток окрашены в синий, цитоплазма - в голубой цвет различной интенсивности. При наличии эозинофильных гранулоцитов в цитоплазме имеется зернистость красного или ярко - розового цвета. Слизь голубого цвета. Бактериальная флора окрашена в синий цвет различной интенсивности. Гонококки темно - синего цвета, резко очерчены, бобовидной формы, парные; располагаются внутриклеточно, в слизи и в эпителиальных клетках.

Влагалищные трихомонады: ядра овальные, синего цвета, расположены эксцентрично, цитоплазма чётко очерчена, сетчатая, светло - синяя; вакуоли бесцветные.

Обнаружение гонококков и влагалищных трихомонад в исследуемом материале, окрашенном бриллиантовым зелёным.

Реактивы.1 .0,5% водный раствор бриллиантового зелёного.

2.96° этиловый спирт.

Окраска. Препарат фиксируют 3 мин в 96° этиловом спирте, высушивают, наносят 0,5% раствор бриллиантового зелёного на 1 мин. Затем тщательно смывают краситель под струёй холодной воды и высушивают в штативе.

Микроскопия. Препарат зелёного цвета: ядра клеток окрашены в зелёный цвет, цитоплазма - в светло - зелёный. Слизь зелёного цвета. Бактериальная флора окрашена в зелёный цвет различной интенсивности. Гонококки тёмно - зелёного цвета, чётко очерчены, бобовидной формы, парные, располагаются внутриклеточно, в слизи и на эпителиальных клетках. Влагалищные трихомонады с чёткой оболочкой, полиморфные (округлые, овальные, полигональные), расположены между клеточными элементами или в слизи. Ядро интенсивно окрашено в зелёный цвет, расположено эксцентрично. Цитоплазма сетчатая, светло - зелёного цвета; вакуоли бесцветные.

Обнаружение гонококков и влагалищных трихомонад в исследуемом материале, окрашенном по модифицированному способу Грамма.

Метод основан на свойстве гонококков, влагалищных трихомонад и других грамоотрицательных микроорганизмов отдавать основной фиолетовый краситель при обесцвечивании на протяжении определённого времени в этиловом спирте и на свойстве докрашиваться в дальнейшем дополнительным оранжево - красным красителем.

Реактивы.1 .1% водный раствор кристаллвиолета.

2. Водный раствор Люголя.

3.96 ° этиловый спирт.

4.1% водный раствор нейтрального красного.

Окраска. Препарат покрывают фильтровальной бумагой и заливают её

1% водным раствором кристаллвиолета на 1 мин.

Для того чтобы между фильтровальной бумагой и предметным стеклом не было пузырьков воздуха, полоску фильтровальной бумаги, смоченной кристаллвиолетом, придавливают стеклянной пипеткой или палочкой к стеклу.

Через 1 минуту фильтровальную бумагу удаляют, препарат промывают струёй водопроводной воды и заливают на несколько секунд раствором Люголя до почернения мазка.

Затем остаток раствора Люголя смывают и обесцвечивают препарат в 96 ° этиловом спирте, поочерёдно погружая и вынимая препарат из спирта, находящегося в стаканчике.

Обесцвечивают препарат до тех пор, пока с его тонких участков не будут стекать фиолетовые струйки красителя и они приобретут бледно - серый цвет.

После этого препарат быстро промывают под струёй водопроводной воды и докрашивают в течение 3 мин 1% водным раствором нейтрального красного, снова тщательно промывают (пока струя воды, стекающая с него, станет прозрачной) и высушивают.

Микроскопия. При правильной окраске препарат должен иметь оранжево - красный цвет на тонких участках и лилово - фиолетовый - на толстых. Ядра клеточных элементов (лейкоцитов, эпителиальных клеток), частично удерживающих основную фиолетовую окраску, должны быть окрашены в центре в фиолетовый цвет, по переферии - в оранжево - красный, а гонококки, расположенные в лейкоцитах и на эпителиальных клетках, должны иметь оранжево - красный цвет.

Необходимое качество окраски обесцвечивается своевременным прекращения обесцвечивания препарата.

При недообесцвечивании, когда ядра клеток интенсивно окрашены в фиолетовый цвет, гонококки могут сохранять фиолетовую окраску; при переобесцвечивании, стафилококки и стрептококки могут быть окрашены в оранжево - красный цвет и приняты за гонококки.

Идентификация гонококка производится на основании его морфологических свойств, локализации и отношения к окраске по Грамму Гонококки - это парные кокки, имеющие форму кофейных зёрен, обращены друг к другу вогнутой стороной.

Размножаясь делением в различных плоскостях цепочек не образуют. Внутри лейкоцитов гонококки располагаются парами или группами таким образом, что одни из них лежат по отношению к другим под различным углом.

Внеклеточно расположенные гонококки также имеют характерные особенности. Чаще всего они в большом количестве лежат в клетках плоского эпителия рядами с расположением внутри ряда перпендикулярно друг другу. Частота внутри - и внеклеточной локализации гонококков зависит как от природы заболевания, так и от методики взятия материала. При идентификации гонококка необходимо учитывать все три его основных признака. Положительное заключение даётся при обнаружении типичных форм гонококка.

Влагалищная трихомонада окрашивается бледно: оболочка в виде тонкой полоски окружает сетчатую цитоплазму оранжево - красного цвета, ядро сиреневого или фиолетового цвета, жгутики и ундулирующая мембрана не просматривается.

Обнаружение влагалищных трихомонад в исследуемом материале при изучении нативного препарата.

Метод основан на обнаружении возбудителя в препарате по его движению среди клеточных элементов и микроорганизмов.

Реактив.1 . Изотонический раствор хлорида натрия.

Приготовление препаратов . На предметное стекло наносят каплю тёплого изотонического раствора натрия хлорида и смешивают с исследуемым отделяемым с очага заболевания. Взвесь накрывают покровным стеклом и микроскопируют.

Микроскопия. Влагалищную трихомонаду определяют по грушевидной, округлой или овальной форме, небольшой величине (немного больше лейкоцита), характерными толчкообразными движениями ундулирующей мембрангы и жгутиков, которые особенно хорошо видны под микроскопии с тёмнопольным или фазовоконтрастным конденсором.

Вагинит (кольпит) - воспаление слизистой оболочки влагалища. Вызывается стрепто- и стафилококками, трихомонадами и грибками. Может возникнуть при несоблюдении правил личной гигиены при гипофункции яичников, сахарном диабете и др.

При лабораторном исследовании отмечается значительное количество дегенеративно изменённых лейкоцитов и клеток многослойного плоского эпителия.

Канидозный кольпит. Вызывается грибками рода Candida.

При лабораторном исследовании в мазках отмечается наличие большого количества лейкоцитов и утолщённых фрагментированных палочек

(грибков рода Candida ). Иногда отмечается наличие мицелия этих грибков.

Лептотрикс. Вызывается дрожжеподобными грибками.

Микроскопически в мазках внутри утолщённых фрагментированных палочек отмечается наличие красных включений.

Гарднеллёз. Вызывается гарднереллой. Диагносцируется в мазках, содержащих небольшое или умеренное количество лейкоцитов, обильной мелкой кокковой влагалищной флоры и " ключевых клеток " (клеток - ловушек), сплошь покрытых коккобактериями.

При гарднеллёзе отмечается рыбий запах вагинальных выделений при добавлении 1-2 капель 10% раствора КОН.

Вирус папилломы человека (ВПЧ).

Признаки:

Наличие койлоцитов, т.е. клеток с утолщенными краями цитоплазмы, широкой прозрачной перенуклеарной зоной и округлым гиперхромным ядром.

Двухядерных и многоядерных клеток.

Дискариоз.

Митозы.

Койлоциты нередко сочетаются с дисплазией многослойного плоского эпителия.

Хламидиоз. Вызывается хламидиями (внутриклеточные паразиты), близкие по своим свойствам к бактериям. Обнаруживаются при ИФА.

Сифилис - инфекционное заболевание, характеризующееся хроническим рецидивирующим течением с поражением всех органов и систем. Передаётся преимущественно половым путём. Возбудитель - бледная трепонема, имеющая спиралевидную форму с равномерными витками, суживающимися на концах, что делает её похожей на штопор. Она обладает активными движениями (сгибательными, поступательными, ротарными, контрактильными).

Материалом для исследования на бледную спирохету служит тканевая жидкость, отделяемое твёрдого шанкра, из эрозий, язв, папул.

Исследование производят в тёмном поле зрения.

Препарат для исследования готовят следующим образом: на предметное стекло помещают каплю физиологического раствора и такое же количество исследуемого материала. Смешивают, накрывают покровным стеклом и просматривают на тёмном фоне.

Среди фоновых процессов, связанных с гормональными нарушениями, выделяют эндоцервикозы, полипы, папилломы и простую форму лейкоплакии.

К эндоцервикозам относятся железистые эрозии, псевдоэрозии, железисто - мышечные гиперплазии.

Морфологически эндоцервикозы неоднородны, что дало основание подразделить их на простые, пролиферирующие и заживающие.

При простой форме эндоцервикоза призматический эпителий поверхности и желёз не имеет признаков пролиферации.

Пролиферирующие формы характеризуются новообразованием железистых структур за счёт гиперплазии резервных клеток. При заживающих эндоцервикозах отмечается либо рост многослойного плоского эпителия с краёв эндоцервикоза, и вытеснение призматического эпителия, либо новообразование многослойного плоского эпителия путём метаплазии из резервных клеток призматического эпителия. В мазках при эндоцервикозе могут появляться клетки призматического и многослойного плоского эпителия.

Аденоматозные полипы шейки матки по своим морфологическим признакам напоминают эндоцервикозы и по состоянию эпителиямогут быть подразделены на простые, пролиферирующие и эпидермизирующие формы.

Простые формы характеризуются наличием на поверхности и в железах клеток высокого призматического эпителия с базальным расположением ядер.

При пролиферирующих формах отмечается гиперплазия резервных клеток с новообразованием желёз.

При эпидермизирующих появляются клетки метапластического многослойного плоского эпителия.

Лейкоплакия ( простая форма) шейки матки является выражением прозоплазии, т е. повышения уровня дифференцировки многослойного плоского эпителия.

При простой форме лейкоплакии отмечается утолщение многослойного плоского эпителия, незначительный акантоз и разной степени выраженности гипер- и паракератоз.

Заключение

Актуальность данной темы очевидна, так как фоновые

неспецифические и специфические заболевания половой сферы являются предшественниками предраковых и раковых заболеваний женских половых органов.

Проведение массовых гинекологических осмотров призвано обеспечить максимальную эффективность осмотров путём проведения цитологических исследований у каждой осмотренной женщины, что способствует выявлению не только фоновых, но и предраковых и раковых заболеваний женских половых органов.

Это позволяет предупредить и выявить онкологические заболевания в доклинической стадии.