б) при переносе гамет или эмбрионов используется лапароскопия, которая является хоть и малоинвазивным методом, но тем не менее оперативным вмешательством, не говоря уж о стоимости;
в) врачи-репродуктологи, которые долгое время занимались переносом в полость матки, естественно, делают это лучше (и можно ограничиться лишь переносом в полость матки);
г) при использовании переноса зигот в лаборатории оплодотворенная яйцеклетка находится всего в течение суток, при использовании переноса эмбриона в маточную трубу — в течение 2 суток.
По данным противников переноса в маточную трубу эти сроки не позволяют провести селекцию наилучшего эмбриона, как это можно сделать при переносе в полость матки (на 3-5 день в лаборатории).
В целом данные противоречивы, и выбор того или иного метода определяется каждый раз индивидуально с учетом ряда факторов.
КРИОКОНСЕРВАЦИЯ ГАМЕТ И ЭМБРИОНОВ
Криоконсервация гамет и эмбрионов – это технология, которая позволяет сохранять в специальных низкотемпературных условиях сперматозоиды, яйцеклетки и эмбрионы.
Технология замораживания яйцеклеток является сравнительно новой, однако, к 2007 году во всем мире было рождено уже 200 детей после оплодотворения размороженной яйцеклетки и переноса эмбрионов.
В некоторых случаях, в частности, при онкологических заболеваниях у мужчин и женщин, когда планируется удаление яичников или яичек, а также в случаях, когда необходимо проведение химио- или лучевого лечения, необходимо заранее получить половые клетки и заморозить их отдельно или после оплодотворения. Именно для таких пациентов и предлагаются данные программы. По данным различных лабораторий мира, средняя частота наступления беременности при переносе замороженных эмбрионов составляет около 50%.
Эмбрионы могут быть заморожены на любой стадии своего развития: начиная с однодневного их возраста, заканчивая стадией бластоцисты (5-6 дней), при этом замораживание эмбрионов «старшего» возраста позволяет отобрать наиболее качественные из них.
Каким же образом происходит замораживание и как это возможно?
В настоящее время используется процесс сверхбыстрого замораживания до температуры -196 градусов Цельсия с последующим сохранением при этой температуре в жидком азоте.
Физически этот процесс представляет собой витрификацию, то есть переход жидкости в стеклообразное состояние, минуя стадию кристаллизации. Этого эффекта можно достичь только при очень быстром понижении температуры клеток. Это является очень важным условием, поскольку кристаллы, которые могут образовываться при замораживании, могут просто повредить эмбрионы.
При проведении этой манипуляции обязательно используются криопротектанты двух видов – «просачивающийся в клетку» (например, пропанедиол) и внеклеточные (такие как сукроза и липопротеин). Эти вещества позволяют:
1. Снизить точку замораживания и предотвратить образование внутриклеточных кристаллов («льдинок»);
2. Защитить клетки, взаимодействуя с их мембранами, в процессе изменения их состояния и становления плотными, или ригидными.
В дальнейшем эмбрионы помещаются в специальные емкости, где хранятся при соответствующей температуре в жидком азоте до момента размораживания.
Как размораживаются эмбрионы?
После соответствующей подготовки женщины, проводится полноценная проверка соответствия маркировки замороженных эмбрионов, далее, при комнатной температуре производится их размораживание. Наиболее важным в этом процессе является не время размораживания, а аккуратная дилюция криопротектантов и сохранение после размораживания эмбрионами их первоначальных свойств.
Этический комитет Американского общества Репродуктивной медицины выделил следующие факторы, повышающие частоту наступления беременности при использовании технологии замораживания эмбрионов:
1. перенос оптимального количества эмбрионов для снижения вероятности развития тройни и четверни;
2. перенос эмбрионов в естественном цикле, а не в стимулированном, в котором содержание эстрогенов и прогестерона не превышает нормальные их значения;
3. максимально возможное снижение количества стимулирующих овуляцию препаратов для повышения вероятности наступления беременности.
Риски и неудачи
Наиболее важным аспектом технологии замораживания эмбрионов является тот факт, что некоторые здоровые эмбрионы могут не выживать в результате стресса от быстрого изменения температуры. В среднем, как правило, не выдерживают около 25-50% эмбрионов.
С другой стороны, криоконсервацию можно рассматривать как дарвиновский естественный отбор, в процессе которого выживают «сильнейшие», которые в дальнейшем и будут перенесены.
Другим важным вопросом при использовании этой технологии является вероятность рождения ребенка с наличием какого-либо дефекта. Многочисленные исследования, проведенные с использованием животных, показали, что применение технологии замораживания/размораживания не приводит к рождению дефектных особей. Исследования у людей доказали отсутствие достоверного увеличения количества отклонений у детей, рожденных в результате переноса размороженных эмбрионов, по сравнению с остальными детьми в популяции. Однако, эти аспекты проблемы продолжают интенсивно изучаться, так же, как и возможности для повышения частоты наступления беременности.
В случае наступления беременности в результате переноса размороженного эмбриона, супружеской паре предоставляется право решения относительно судьбы оставшихся эмбрионов. Они могут быть остаться в замороженном состоянии (по современным данным в течение 5-10 лет), могут быть разморожены или могут стать донорскими и быть перенесенными другой бесплодной женщине.
СУРРОГАТНОЕ МАТЕРИНСТВО
Суррогатное материнство - это один из методов ВРТ, при котором вынашивает беременность, полученную «в пробирке» путем оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом, суррогатная мать, то есть другая женщина.
Это необходимо в тех случаях, когда у женщины есть возможность получить яйцеклетки, у мужчин - сперматозоиды, однако состояние матки (врожденная или приобретенная патология) или ее отсутствие после перенесенных оперативных вмешательств не позволяет выносить беременность.
При подборе суррогатной матери проводится ее комплексное обследование, оформляется медицинская документация, проводится синхронизация ее менструального цикла с циклом бесплодной женщины для того, чтобы подготовить ее организм к переносу, полученного в результате ЭКО или ИКСИэмбриона.
Программы суррогатного материнства, а также юридические основы для использования этого метода сейчас интенсивно обсуждаются во всем мире, поскольку эта проблема имеет не только медицинские аспекты (в частности, пригодность женщин для суррогатного материнства), но также и ряд этических вопросов, требующих легализации и доуточнения.
Например, до настоящего времени суррогатное материнство запрещено в Австрии, Германии, Норвегии, Швеции, Франции и некоторых штатах США. Не смотря на то, что эта программа используется в Бельгии, Греции, Ирландии, Финляндии, юридической основы ее применение не имеет.
Какие же требования предъявляются к женщинам, планирующим стать суррогатной матерью?
• Возраст 23-35 лет;
• Наличие как минимум одного собственного ребенка;
• Не желающие больше иметь собственных детей;
• Замужем или в гражданском браке;
• Финансово-стабильное материальное положение;
• Имеющие поддержку и одобрение близких для выполнения данной роли;
• Не курящие как минимум 6 месяцев до момента «зачатия»;
• Получающие удовольствие от состояния беременности;
• Имеющие серьезное желание помочь бесплодной паре;
• Женщины с нормальным росто-весовым показателем;
• Согласные на аборт при требовании со стороны супружеской пары, ребенка которой она вынашивает; а также на редукцию эмбриона при многоплодной беременности.
В некоторых странах существуют агентства по подбору суррогатных матерей.
Для примера, ниже представлен весь комплекс услуг, предоставляемым одним из агентств, стоимостью около 25 тыс. долл.
• Предоставление кандидатуры суррогатной матери из базы данных центра суррогатного материнства;
• Психологическая диагностика потенциальной суррогатной матери на предмет психологической пригодности и готовности суррогатной матери к участию в программе суррогатного материнства;
• Комплексное медицинское обследование потенциальной суррогатной матери для подтверждения пригодности к экстракорпоральному оплодотворению, вынашиванию беременности и рождению здорового ребенка;
• Первичная юридическая консультация, составление договора между генетическими родителями и суррогатной матерью с учетом всех возможных нюансов индивидуальной ситуации заказчиков и внесением необходимых пунктов в договор «о вынашивании ребенка»;
• Рекомендации по выбору клиники репродуктивной медицины, других необходимых медицинских учреждений;
• Услуги переводчика в процессе первичного консультирования и составления договора между генетическими родителями и суррогатной матерью.
• Координация и контроль программы, до рождения ребенка и получения всех необходимых документов.
• Компенсация суррогатной маме за весь срок беременности (оплата поэтапная -10% по факту наступления беременности, 90% за 4-6 недель до рождения ребенка- денежные средства перечисляются на расчетный счет суррогатной матери;
• Компенсация суррогатной маме, если родится более одного ребенка;
• Ежемесячное содержание на 9 месяцев беременности – выплачивается помесячно; Медицинское наблюдение во время беременности – стоимость услуг клиники и всех необходимых анализов;
• Медицинское страхование суррогатной мамы от несчастных случаев;
• Оформление документов на ребенка, для дальнейшей подачи в посольство;
• Стоимость контроля и сопровождения программы с момента заключения договора между суррогатной матерью и генетическими родителями (Заказчиками) до пересадки эмбриона к суррогатной матери;
• Стоимость контроля и сопровождения программы с момента заключения договора между суррогатной матерью и генетическими родителями (Заказчиками) до подтверждения факта наступления или не наступления беременности;
• Стоимость компенсации донора, медицинское обследование, стоимость услуг нашего центра.
• Круглосуточное наблюдение куратора за суррогатной мамой, выполнение всей домашней работы, сопровождение к врачу и полный отчет о проделанной работе, с предоставлением отдельного жилья;
•Стоимость медицинских услуг оплачивается дополнительно.
В соответствии с действующим Семейным кодексом РФ (от 8.12.95, раздел 4, глава 10, статья 51, пункт 4, часть вторая): "Лица, состоящие в браке между собой и давшие своё согласие в письменной форме на имплантацию эмбриона другой женщине в целях его вынашивания, могут быть записаны родителями ребёнка только с согласия женщины, родившей ребёнка (суррогатной матери)".
В медицинском учреждении обе стороны (суррогатная мать и будущие родители) подписывают только необходимую медицинскую документацию, однако юридическую сторону вопроса в нашей стране участники данного процесса должны урегулировать самостоятельно при помощи соответствующих служб (заключение договора).
ОВОДОНАЦИЯ
Оводонация, или донорство яйцеклеток, это один из методов ВРТ, при котором для оплодотворения используются яйцеклетки донора.
Впервые этот метод был успешно применен в 1982 году, и к настоящему времени, например, в США ежегодно используется около 15 000 донорских яйцеклеток для оплодотворения. Средняя эффективность ЭКО с использованием этой технологии составляет около 50%.
Каковы же показания к использованию данного метода?
1. Основным показанием к использованию данного метода является отсутствие ооцитов (в которых содержатся яйцеклетки) у женщины, что связано с:
• естественной менопаузой;
• сниженным овариальным резервом (аномалии развития, синдром преждевременного истощения яичников, состояние после удаления или резекции яичников, радио- или химиотерапии).
2. Наличием генетических аномалий ооцитов при нормальном их количестве, что делает невозможным их использование для оплодотворения.
Как правило, донорами яйцеклеток являются либо:
1. родственники пациентки, желающей иметь беременность;
2. специальные доноры, список которых с описанием их рода занятий, внешности, группы крови и пр. можно получить в специализированном медицинском учреждении.
Доноры яйцеклеток не должны быть старше 34 лет, должны иметь собственного здорового ребенка и не иметь никаких ярких внешних особенностей.
Донорам яйцеклеток проводится стимуляция овуляции (их цикл синхронизируется с циклом будущей матери), далее пункция фолликулов для получения яйцеклеток, которые затем проходят все стадии процесса ЭКО.
Ведение беременностей, наступивших после экстракорпорального оплодотворения у женщин с привычным невынашиванием, обусловленным иммунологическими нарушениями
П ациентки, страдающие привычным невынашиванием беременности, составляют группу риска по реализации нарушений имплантации и плацентации в I триместре беременности. Подобные нарушения чаще всего обусловлены иммунными взаимодействиями между эндометрием и клетками развивающегося трофобласта [1–3].
Женщины, которым проводится экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО), как правило, имеют гормональные проблемы, страдают хроническими воспалительными заболеваниями и как следствие – спаечными процессами в области малого таза, нередко перенесли одно или несколько оперативных вмешательств на матке, яичниках и трубах. При этом трудности с наступлением беременности, решаемые благодаря использованию вспомогательных репродуктивных технологий, сочетаются с иммунологическими проблемами, что в ряде случаев ведет к повторным ранним репродуктивным потерям. У пациенток с повторными потерями плода формируется так называемый порочный круг, когда иммунопатологический процесс активируется с самых ранних этапов развития беременности [4].
Защитные функции иммунной системы на ранних этапах гестации в виде подавления активности естественных киллеров в эндометрии, продукции блокирующих факторов организмом матери обеспечиваются различными, во многом гормонозависимыми механизмами, при нарушении которых возникают неудачи имплантации либо ранние самопроизвольные прерывания беременности [5].
При аутоиммунных процессах предметом агрессии иммунной системы становятся собственные ткани материнского организма, т.е. имеет место направленность антительного ответа против собственных антигенов. Развивающееся плодное яйцо поражается в результате тромбоза сосудов трофобласта, ограничения его инвазии, а иногда и в результате прямого повреждающего воздействия аутоантител на фосфолипиды формирующейся плаценты [6–9]. При аллоиммунных реакциях иммунный ответ женщины направлен против антигенов эмбриона, полученных от отца, что также препятствует формированию полноценной защитной реакции в эндометрии [2].
В этой связи вопросы предгестационной подготовки, способной нормализовать иммунные взаимодействия в эндометрии и предотвратить каскад патологических изменений, приобретают исключительную значимость, особенно у супружеских пар в программе ЭКО.
Кроме того, схемы стимуляции овуляции с использованием высоких доз гормональных препаратов приводят к изменениям иммунологического, гормонального, гемостазиологического статуса женщины, что требует своевременной диагностики и коррекции. Ведение беременности после ЭКО требует оказания высокотехнологичной медицинской помощи с самых ранних этапов гестации для предотвращения самопроизвольного прерывания.
С учетом изложенногоцелью проведенного исследования явилась разработка алгоритма диагностики и терапии у женщин с привычным невынашиванием, ауто- и аллоиммунной патологией перед проведением ЭКО.
Материалы и методы исследования
Нами проведено обследование, лечение и проспективное наблюдение 60 супружеских пар с двумя и более потерями беременности в анамнезе, планирующих проведение ЭКО. Всем пациентам проводилось комплексное клинико-лабораторное обследование вне беременности по схеме ОНБ Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН, включающее: тесты функциональной диагностики, исследования гормонального статуса, определение волчаночного антикоагулянта, антител к хорионическому гонадотропину, биохимических показателей, бактериологическое, вирусологическое обследование, ультразвуковую и рентгенологическую диагностику, генетическое консультирование, исследование спермограммы мужа.
Помимо вышеуказанных были проведены:
• исследование продуктов антигенов главного комплекса гистосовместимости (HLA) I и II классов у супружеских пар – по локусам А, В, С, DR, DQa, DQb;
• исследование циркуляции антител кb2 -гликопротеину, аннексину, протромбину, фосфатидилхолину, фосфатидилсерину, фосфатидилинозитолу, сфингомиелину, кардиолипину;
• определение активности естественных антикоагулянтов – антитромбина III, протеинов С и S у женщин с выявленной аутоиммунной патологией;
• гемостазиологический контроль с изучением маркеров внутрисосудистого тромбообразования (Д-димеров, растворимых комплексов мономеров фибрина) до наступления беременности и в динамике после получения первых позитивных показателейb-субъединицы хорионического гонадотропина.
Результаты исследования и их обсуждение
После детального обследования в группу наблюдения было отобрано 60 супружеских пар с диагностированными иммунологическими нарушениями, из них 32 с аллоиммунной патологией и 28 с аутоиммунными проблемами. Средний возраст женщин составил 32,0±4,2 года, 66,7% женщин были старше 30 лет.
Проведя анализ соматической заболеваемости у данной группы женщин, мы отметили высокий инфекционный индекс – 4,5±0,21. Заболевания сердечно-сосудистой системы были представлены преимущественно вегетососудистой дистонией по гипотоническому или гипертоническому типу, у одной пациентки имелся пролапс митрального клапана I степени без регургитации; заболевания органов дыхания проявлялись хроническим бронхитом; из заболеваний желудочно-кишечного тракта отмечались гастрит, язвенная болезнь желудка и дискинезия желчевыводящих путей. У 25% пациенток данной группы встречались заболевания мочевой системы в виде хронического пиелонефрита и цистита. Патология щитовидной железы у 5 (8,3%) женщин была представлена аутоиммунным тиреоидитом с явлениями субклинического гипотиреоза.
При анализе структуры гинекологической патологии выявлено, что 30% женщин имели в анамнезе эктопию шейки матки; воспалительные заболевания половых органов были представлены хроническим эндометритом и хроническим сальпингоофоритом у 46,7%; олигоменорея отмечена у 10% женщин.
Гинекологические операции всем пациенткам проводились лапароскопическим доступом: миомэктомия у 3 (5,0%) больных; иссечение внутриматочной перегородки у 1 (1,7%) пациентки; тубэктомия по поводу трубной беременности у 6 (10%); резекция яичника в связи с наличием эндометриоидной кисты у 1 (1,7%); каутеризация обоих яичников у 1 (1,7%), коагуляция очагов наружного генитального эндометриоза у 4 (6,7%) женщин.
Гормональные нарушения в виде гиперандрогении встречались у 20% женщин, причем потеря предыдущей беременности происходила на фоне приема глюкокортикоидов; гиперпролактинемия наблюдалась у 8,3% женщин, недостаточность лютеиновой фазы у 40%.
Абсолютное большинство беременностей (179 – 84% всех беременностей) у обследованных женщин самопроизвольно прервалось в I триместре.
Из них наиболее часто отмечены выкидыши в сроках 5–8 нед беременности – 50,7%. Выкидыши в 9–12 нед встречались несколько реже – 21,6%, анэмбрионии – в 11,7% от числа всех беременностей.
В ходе исследования отобраны 32 супружеские пары с аллоиммунным фактором привычных потерь беременности – с тремя общими аллелями системы HLA и более.
При анализе антигенов системы HLA I класса отмечено статистически значимое повышение частоты встречаемости антигена В35 у мужчин в группе с привычным невынашиванием беременности – частота гена составила 0,162 по сравнению с 0,071 в популяции (p<0,05).
В группе с привычным невынашиванием достоверно реже, чем в популяции, как у мужчин, так и у женщин встречался антиген А11 (p<0,05 и p<0,01 сооответственно), у женщин достоверно реже отмечены антигены В7 (p<0,05), Cw4 (p<0,01), у мужчин – Cw2 (p<0,05).
У пар с HLA-совместимостью по I классу значительно чаще встречаются совпадения антигенов локуса А – 87,7%. Однако наибольшее количество потерь беременности в анамнезе приходится на пары, имеющие совместимость по трем аллелям системы HLA II класса. Так, у 50% пар имелись общие аллели во всех трех локусах. Из оставшихся 16 пар, имеющих общие аллели в двух локусах, преобладали сочетания DQA1 и DQB1.
По встречаемости общих аллелей в локусе преобладает локус DQA1 – 81,3%. При количественном анализе встречаемости аллелей 0201 по локусам DQA1 и DQB1 отмечено преобладание аллеля 0201 у мужчин по локусу DQA1 в 28,1% случаев, по локусу DQB1 в 31,3% случаев. У женщин встречаемость аллеля 0201 была достоверно ниже – 9,4 и 12,5% соответственно. Нами выявлено достоверно значимое повышение частоты встречаемости аллеля 0201 по локусу DQA1 у мужчин по сравнению с данными в популяции (p<0,001).
У пар с выявленной HLA-совместимостью проводился курс предгравидарной подготовки,
8-09-2015, 19:38