4.1.4 Обнаружение сапонинов .
Проводили реакцию пенообразования водных извлечений исследуемых объектов с гидроксидом натрия и с соляной кислотой, после встряхивания образовывалась устойчивая пена во всех случаях, что свидетельствует о наличии сапонинов тритерпеновой природы.
4.1.5 Обнаружение алифатических кислот .
Исследование алифатических кислот проводилось и ранее, но нам представилось интересным проверить наличие таких кислот как щавелевая, янтарная, яблочная и винная и подтвердить наличие уже известной лимонной кислоты.
Исследовалось только водное извлечение хвоща полевого.
Результаты представлены в таблице 9.
Таблица 9
| Проведенная реакция |
Результат |
| 1.реакция на щавелевую кислоту |
Осадка не образовалось |
| 2.р-ция на янтарную кислоту |
Зеленая флуоресценция не появилась |
| 3.р-ция на лимонную кислоту |
при нагревании появилось фиолетовое окрашивание |
| 4.р-ция на яблочную кислоту |
при нанесении на хроматогр. бумагу крайняя зона после разделения флуоресцирует желто-зеленым цветом |
| 5.р-ция на винную кислоту |
образуется малиновое окрашивание, переходящее при нагревании в вишневое |
Результаты таблицы свидетельствуют о наличии в траве хвоща полевого лимонной, яблочной и винной кислот.
4.1.6 Определение полисахаридного комплекса .
Для разделения полисахаридного комплекса использовали метод восходящей бумажной хроматографии в системе ацетон:бутанол:вода с использованием сахаров-свидетелей. После обработки хроматограммы анилинфитолатом и нагревания в сушильном шкафу при t° 105°С обнаружились пятна с Rf=0.27 и Rf=0.24, что соответствует ксилозе и арабинозе.
4.1.7 Определение минерального состава .
В результате проведения рентгено-флуоресцентного анализа на спектрометре «Спектроскан» сухих остатков хвощей полевого, лугового, лесного, зимующего и болотного были обнаружены следующие тяжелые металлы: свинец, цинк, никель, медь, кобальт, железо, марганец, хром.
4.1.8 Сесквитерпеновые лактоны
ИК спектры полученной «смолки» в пленке давали полосы поглощения 1750см-1, что свидетельствует о g-лактонной природе выделенной суммы веществ.
4.1.9 Соединения кремния
Реакция образования желтого и синего кремнемолибденового комплекса с молибдатом аммония в кислой среде с использованием в качестве восстановителя аскорбиновой кислоты, подтвердила наличие во всех исследуемых видах соединений кремния.
4.2 Количественное определение.
4.2.1 Определение содержания флавоноидов
Для изучения содержания флавоноидов использовали методику хроматоспектрофотометрического определения. Исследование показало,что наибольшее количество флавоноидов содержится в хвощах полевом и болотном, в остальных исследуемых образцах количество флавоноидов несколько ниже.
Результаты представлены в таблице 10
Таблица 10
| хвощ полевой |
хвощ лесной |
хвощ зимующий |
хвощ луговой |
хвощ болотный |
| 3,37% |
1,09% |
2,83% |
3,2% |
3,78% |
4.2.2 Определение содержания кремния
Определение проводили используя метод фотоколориметрии , результаты исследования показали, что содержание соединений кремния в траве хвоща полевого составило 1,11%, в траве хвоща лесного- 1,12%, в траве хвоща зимующего 2,12%, в траве лугового и болотного соответственно 1,67% и 2,08%.
4.2.3 Изучение содержания экстрактивных веществ в траве хвоща полевого.
Определение содержания экстрактивных веществ проводили параллельно с исследованием по выбору экстрагента и времени экстрагирования. Результаты исследования представлены в таблицах.
Из представленных данных в таблице 11 видно, что максимальное количество экстрактивных веществ в траве хвоща полевого извлекается водой очищенной, как холодной так и горячей.
Содержание экстрактивных веществ в траве хвоща полевого в зависимости от экстрагента. (1)
Таблица 11
| Экстрагент |
Выход, г |
% |
| Этанол 40% |
5,78 |
28,92 |
| Этанол 70% |
5,8 |
29,0 |
| Этанол 96% |
1,8 |
9,0 |
| Вода 20°С |
6,88 |
34,4 |
| Вода 90-100°С |
7,31 |
36,55 |
| Хлороформ |
1,4 |
7,0 |
| Ацетон |
0,15 |
2,14 |
Исследование времени настаивания на выход экстрактивных веществ показало, что максимальный выход наблюдается после 16-ти часов настаивания и в последующие часы меняется незначительно и находится в пределах от 34 до 34,45.
Полученные результаты приведены в таблице 12, в качестве экстрагента использовалась вода горячая.
Влияние времени настаивания на выход экстрактивных веществ хвоща полевого.
Таблица 12
| № |
Время экст-ции, час |
Выход, г |
Выход, % |
| 1. |
12 |
5,83 |
29,15 |
| 2. |
14 |
6,22 |
31,1 |
| 3. |
16 |
6,86 |
34,3 |
| 4. |
18 |
6,8 |
34 |
| 5. |
20 |
6,89 |
34,45 |
4.2.4 Обнаружение эфирных масел.
Проводили по фармакопейной методике. В результате проведенного исследования эфирное масло не было обнаружено, поэтому количественное определение не проводили.
4.2.5 Определение полисахаридного комплекса .
После фильтрования осадков на воронке Бюхнера, фильтры с осадками высушивали и взвешивали на аналитических весах (перед фильтрованием чистые фильтры также взвешивались на аналитических весах).Результаты представлены в таблице 13.
Содержание полисахаридных фракций в траве хвоща полевого.
Таблица 13
| № |
Фракция |
Масса фильтра, г |
Масса фильтра с осадком, г |
Масса осадка, в г в % |
|
| 1. |
Фр. А |
0,2268 |
0,4564 |
0,2296 |
2,1 |
| 2. |
Фр. Б |
0,22537 |
0,29861 |
0,07324 |
0,62 |
| 3. |
Фр. В |
0,22076 |
0,4009 |
0,18014 |
1,35 |
| Масса общая |
0,48298 |
4,07 |
|||
По результатам таблицы 12 следует, что содержание комплекса полисахаридов в траве хвоща полевого составляет около 4,07%. Значительную часть из этого комплекса занимают водорастворимые полисахариды, которые составляют 2,1% (фр.А), чуть меньше содержится полисахаридов гемицеллюлезы и составляет 1,35% (фр. В), пектиновые вещества составляют лишь 0,62%.
4.2.5 Содержание микроэлементов .
Результаты таблицы 14 показывают, что в траве хвоща полевого больше всего содержится железа и марганца, в траве хвоща болотного, лугового и зимующего больше железа и цинка, в траве хвоща лесного больше марганца и цинка. Содержание в образцах свинца, никеля, меди, кобальта, марганца (за исключением полевого), хрома относительно не высокое.
Таблица 14
| Хвощи |
Pb |
Zn |
Ni |
Cu |
Co |
Fe |
Mn |
Cr |
| Полевой |
0,82 |
11,4 |
7,44 |
0,34 |
1,11 |
16,5 |
30,39 |
1,11 |
| Луговой |
1,15 |
10,2 |
2,42 |
0,67 |
1,43 |
8,82 |
4,33 |
1,43 |
| Зимующий |
2,78 |
26,54 |
4,67 |
2,45 |
2,78 |
52,8 |
7,51 |
0,83 |
| Лесной |
1,72 |
17,5 |
2,80 |
1,33 |
1,72 |
13,73 |
30,1 |
0,52 |
| Болотный |
1,52 |
13,6 |
1,99 |
0,59 |
1,52 |
56,94 |
3,21 |
1,52 |
Содержание элементов рассчитано в миллиграммах на килограмм сухого остатка.
4.3 Товароведческие показатели .
Проведен товароведческий анализ травы хвоща полевого собранного на территории Томской области в 1996-1998 гг. Анализ проводился в соответствии с фармакопейной статьей на хвощ полевой (ГФ XI том 2 ст. 50).Результаты анализа приведены в таблице 15.
Результаты товароведческого анализа
Таблица 15
| № |
Наимен-е показателей качества по НД |
Требования к качеству по НД |
Результаты анализа |
| Описание |
Стебли до 30 см, жесткие, членистые. Ветви не разветвленные, косо вверх направ-е, влагалища цилиндр-ие. Цвет серо-зеленый, запах слабый, вкус кисловатый. |
Соответствует |
|
| Показатели |
|||
| 1. |
Влажность |
не более 13% |
7,24% |
| 2. |
Зола общая |
не более 24% |
18,37% |
| 3. |
Зола нераств-ая в 10% HCL |
не более 12% |
8,45% |
| 4. |
Др. частей раст-й |
не более 1% |
0,1% |
| 5. |
Др. Видов хвощей |
не более 4% |
нет |
| 6. |
Орг. примеси |
не более 1% |
0,15% |
| 7. |
Минер. примеси |
не более 0,5% |
нет |
Заключение: сырье соответствует требованиям нормативной документации.
Глава V Разработка технологического процесса получения сухого экстракта
Характеристика готового продукта :
Экстракт хвоща полевого сухой- фармацевтический препарат применяемый в качестве лекарственного средства.
Экстракт хвоща полевого представляет собой комплекс водорастворимых веществ, состоящий из сапонинов, полисахаридов, дубильных веществ, алифатических кислот и других соединений травы хвоща полевого.
Описание :
Аморфный порошок коричневого цвета, гигроскопичен. В герметически закрытой таре сохраняет сыпучесть, при доступе влаги комкуется.
Своеобразный вкус и запах.
Растворимость : растворим в воде, спирте.
Подлинность .
Реакция на кремний. Образование желтого и синего кремнемолибденового комплекса с молибдатом аммония в кислой среде. В качестве восстановителя использовали аскорбиновую кислоту.
К сухому экстракту добавляли 2% раствор хлористоводородной кислоты, добавляли 2 мл 10%-го подкисленного раствора молибдата аммония, наблюдали желтое окрашивание, при добавлении нескольких кристалликов аскорбиновой кислоты раствор становился интенсивно-синего цвета.
Реакция на сапонины тритерпеновой природы.
К 0,1 г экстракта добавить 2 мл воды и добавить несколько капель основного ацетата свинца. Появляется белый осадок, подтверждающий наличие сапонинов тритерпеновой природы.
Реакция пенообразования (см выше).
Хранение :
В сухом защищенном от света месте при темпиратуре не выше 20°С.
Технологическая схема производства.
ТП 1. Получение исходного извлечения.
1.1 Измельчение травы хвоща полевого.
ß
1.2Удаление пыли.
ß
1.3 Экстракция сырья.
ß
1.4 Отстаивание извлечения.
ß
1.5 Фильтрация извлечения.
ß
ТП 2. Получение готового продукта.
2.1 Упаривание извлечения.
ß
2.2 Сушка извлечения.
ß
2.3 Измельчение готового продукта.
ß
2.4 Фасовка и оформление готовой продукции.
Промежуточные продукты. Сырье. Материалы .
Основным сырьем для получения экстракта хвоща полевого сухого на стадии ТП-1 является измельчение до частиц размером 7мм травы хвоща полевого, освобождение от пыли (частиц менее 0,25мм). Влажность не более 13%, золы общей не более 24%.
В качестве экстрагента использовалась вода очищенная при температуре 100°С в момент подачи на сырье.
На стадии ТП-2. Получаем готовый продукт-комплекс водорастворимых веществ, состоящи из: сапонинов, дубильных веществ, полисахаридов, алифатических кислот и других соединений.
Требования к качеству применяемых в производстве сырья и материалов.
Таблица 16
| № |
наимен-е сырья и материалов |
№ ГОСТ или ТУ |
Квалификация |
Сорт или артикул |
% сод-я осн. вещества |
| 1. |
Трава хвоща полевого |
ФС № 50 |
¾ |
¾ |
% |
| 2. |
Вода очищенная |
ФС № 42 ГФ Xl |
¾ |
¾ |
100% |
Спецификация оборудования, контрольно-аналитических и регулирующих приборов.
Таблица 17
| № |
наимен-е оборуд. измерит. и регул. Приборов |
кол-во |
Материал рабочей части оборудования |
Характеристика оборудования контрольно-измерит. приборов |
| 1 |
Перколятор лабораторный |
4 |
стекло |
емкостью 1 л с краном |
| 2 |
Измельчитель типа траворезки |
1 |
нерж. сталь |
|
| 3 |
Сито 7 мм |
1 |
цв. металл |
диаметр отверстий 7 мм |
| 4 |
Сито 0,25 мм |
1 |
цв. металл |
диаметр отверстий 0,25 мм |
| 5 |
Мерный цилиндр |
1 |
стекло |
емкость 0,5 л |
| 6 |
Весы тарирные |
1 |
металл |
предельная нагрузка 1кг |
| 7 |
Колба сборник |
4 |
стекло |
емкость 300мл |
| 9 |
Сушильный шкаф |
1 |
нерж. сталь |
|
| 10 |
Ступка с пестиком |
1 |
фарфор |
|
| 11 |
Весы аналитические ВЛР 200 |
1 |
нерж. сталь |
предельная нагрузка 200,0 |
| 12 |
Воронка стеклянная |
1 |
стело |
|
| 13 |
Выпарительная чашка |
1 |
фарфор |
Изложение технологического процесса.
ТП-1 Получение исходного извлечения.
1.1 Измельчение травы хвоща полевого.
1.2 Удаление пыли.
60,0 г измельченной травы при помощи сита со стороной отверстия 0,25мм освобождают от пыли (частиц менее 0,25 мм).
1.3 Экстракция сырья.
Экстракцию ведут методом ремацерации. 20,0 измельченной и освобожденной от пыли травы хвоща полевого помещают в перколятор и заливаем 260 мл очищенной воды t°=80-100°С. Экстрагент подают снизу непрерывным потоком под давлением до «зеркала». Затем оставляют на 8 часов для настаивания, после настаивания из перколятора сливают 88 мл извлечения.
В перколятор вновь подают снизу непрерывным потоком под давлением кипящую очищенную воду 92 мл и оставляют на 8 часов. После 8 часов из перколятора сливают 96 млизвлечения. Сырье из перколятора выгружают и отжимают на прессе. Отжим составляет 20 мл.
Извлечение и отжим объединяют и получают
8-09-2015, 23:53