Токсикология

Фармакология

рубежный контроль №1

1. Правила хранения медикаментов, реактивов и других химико-фармацевтических препаратов

2. Рецепт и его составные части

3. Схемы рецептов

4. Несовместимость лекарственных веществ

5. Дозирование лекарственных веществ

6. Твердые (плотные) лекарственные формы.

7. Мягкие лекарственные формы.

8. Жидкие лекарственные формы

9. Пути введения лекарственных веществ

10. Факторы, обусловливающие действие лекарственных

веществ, виды действия лекарственных веществ

токсикология

Тема: Общие меры профилактики микотоксикозов

Цель занятия: освоить общие меры профилактики микотоксикозов.

Меры профилактики микотоксикозов предусматривают скармливание животным доброкачественных кормов, которые заготавливают в оптимальные сроки. Злаки необходимо скащивать до цветения, хорошо их просушивать, правильно хранить в скирдах, укрывая сено пленкой или слоем соломы. Особое внимание должно быть уделено хранению концентрированных кормов как наиболее питательных и ценных.

Консервирование грубых кормов 25 %-ным раствором аммиака из расчета 10 л/ц сена или соломы предупреждает прорастание многих грибов. С целью консервирования сена и соломы применяют каустическую и кальцинированную соду, негашеную известь. Для снижения токсичности зерна используют пиросульфат натрия (S—10 кг/т) или термическую обработку, кроме кормов, которые поражены грибами рода фузариум.

Зерно первой и второй степени токсичности, пораженное грибами из рода пенициллиум, ризопус, мукор, подлежит сухой термической обработке с помощью АВМ-0,65; СБ-1,5 в течение 10—15 мин, а также в котлах под давлением 1 —1,2 атм.

Важным условием профилактики микотоксикозов является соблюдение агротехники возделывания кормо­вых культур, для чего проводят своевременное лущение стерни, раннюю вспашку зяби, соблюдают правила скирдования сена и соломы.

Выпасают животных на пожнивных полях только после предварительного анализа остатков растений на безвредность.

Тема: ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОЧЕВИНЫ ДИМЕТИЛГЛИОКСИМНЫМ

МЕТОДОМ

Цель занятия: освоить определение мочевины диметилглиоксимным методом.

Материадьное обеспечение: 1. 1 г ДМГ растворяют в 100 мл этилового спирта. Раствор стойкий.

2. Реактив Ратнера: к 150 мл воды осторожно прили­вают 50 мл ортофосфорной кислоты, затем 50 мл концен­трированной серной кислоты. Реактив стойкий.

Принцип метода основан на образовании мочевиной с диметилглиоксимом (ДМГ) при нагревании в кислой среде желтого окрашивания, интенсивность которого определяют на ФЭК-М при синем светофильтре в кюве­тах с шириной рабочих граней 5 мм. Реактивы.

Ход анализа . 1 г комбикорма, помещенного в мерную колбу на 100 мл, заливают до метки водой.

После тщательного смешивания фильтруют через слой ваты, затем к 5 мл фильтрата добавляют 5 мл 10 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты или 96 °-ного этилового спирта, тщательно смешивают и фильтруют через бумажный фильтр.

В жидкой части содержимого рубца осаждают белки равным объемом 10 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты или этилового спирта, затем фильтруют через бумажный фильтр.

Во флаконы из под антибиотиков вносят по 0,5 мл безбелкового фильтрата, 0,5 мл раствора ДМГ, 4,5 мл реактива Ратнера, смешивают и закрывают резиновыми пробками к флаконам с антибиотиками, в которые вставлена инъекционная игла. В контрольные пробы вместо фильтрата вносят по 0,5 мл 5 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты.

Флаконы ставят на 1 ч в кипящую водяную баню и после охлаждения интенсивность окраски определяют на ФЭК-М.

Концентрацию мочевины определяют по калибровоч­ной кривой, приготовленной из стандартных растворов, содержащих от 1 до 10 мг % мочевины.

Тема: ФЕРМЕНТНЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОСС

Цель занятия: освоить ферментный метод определения ФОСС.

Материальное обеспечение: Раствор № 1. Берут 200 мг бромтимолового синего и растирают в ступке с 20 мл 0,1 н. раствора едкого натра до растворения. Синий раствор из ступки перено­сят в литровую мерную колбу. В нее вливают 50 мл 0,1 М раствора борной кислоты в 0,1 М растворе хлори­стого калия и доводят дистиллированной водой до 1 л. Раствор должен иметь интенсивно-синюю окраску и рН 8,4.

Раствор № 2. К 9,75 мл раствора № 1 добавляют 0,25 мл 0,1 н. раствора соляной кислоты. Раствор до­лжен иметь желтое окрашивание и рН 3,5.

Раствор Л£ 3. К 1,8 мл раствора № 1 добавляют 0,2 мл 1 %~ного раствора ацетилхолинхлорида (9:1).

Принцип метода основан на определении интенсивности угнетения активности ацетилхолинэстеразы при инку­бации нормальной сыворотки крови лошади, экстракта из патматериала и раствора ацетилхолинхлорида. Сте­пень угнетения фермента устанавливают по изменению окраски бромтимолового синего под воздействием обра­зующейся уксусной кислоты от синей до зеленовато-желтой.

Ход анализа . К 25 г измельченной навески до­бавляют 25 мл бензола и экстрагируют при помешива­нии в течение 1 ч. 0,025 мл экстракта микропипеткой вводят в уленгутовскую пробирку. Туда же добавляют 0,025 мл лошадиной сыворотки крови и 2 мл раствора № 3. Одновременно готовят колориметрический стан­дарт (раствор № 2) и контроль. В контрольную пробир­ку вместо экстракта заливают дистиллированную воду. По скорости изменения окраски от интенсивно-синего до желтого в пробирке с исследуемым экстрактом по срав­нению с контролем определяют наличие или отсутствие фосфорорганического пестицида в пробе.

Этот метод используют для определения остатков ДДВФ, диброма, циодрина; после концентрирования экстрактов — хлорофоса и амидофоса.

Тема: ВЕЩЕСТВА, УСИЛИВАЮЩИЕ СОКРАЩЕНИЕ МАТКИ

Влияние окситоцина на изолированный рог матки

Материальное обеспечение: мышь; физиологический раствор раствор окситоцина в ампулах; ножницы изогнутые и глазные, зонд с ушком, пинцеты Пеана, иголка с нитками, кимограф с лентой, вата, скаль­пель, пипетки, сливательная чашка.

Ход работы:

На ленте кимографа записывают сокращения изолированного рога матки. В стаканчик на каждые 100 мл питающей жидкости добавляют 1...2 капли раствора окситоцина, содержащего в 1 мл 10 ЕД препарата. Отмечают уси­ление сокращений рога матки, повышение ее тонуса вплоть до спазма.

Вывод:

Окситоцин усиливает сокра­тительную способность матки.

Тема: ПРОТИВОПРОТОЗОИНЫЕ ВЕЩЕСТВА

Действие этакридина лактата на простейших.

Материальное обеспечение: лягушка; эфир, растворы этакридина лактата (1 : 500) и изотонический натрия хлорида; колпак, вата, препаровальная доска, ножницы, скальпель, пинцет, предметные стекла.

Ход работы:

У обездвиженной под наркозом лягушки делают соскоб со сли­зистой прямой кишки и помещают его на предметное стекло в предварительно нанесенную каплю изотонического раствора на­трия хлорида. Под небольшим увеличением микроскопа отмечают движение гельминтов (опалинов). При внесении капли раствора этакридина лактата (1 : 500) движения опалинов замедляются и прекращаются.

Тема: Вещества отдающие кислород

Влияние перекиси водорода, калия перманганата и формальдегида на простейших.

Материальное обеспечение : лягушка; 0,6%-й раствор натрия хлорида, 3%-й ра­створ перекиси водорода, 1%-й раствор калия перманганата, 2%-й раствор фор­мальдегида; пипетка глазная, микроскоп, четыре часовых стекла.

Ход работы:

Содержимое прямой кишки лягушки, разведенное 0,6%-м ра­створом натрия хлорида (получение содержимого см. «Влияние фенола на простейших»), наносят по одной капле на четыре часо­вых стекла. Под малым увеличением микроскопа убеждаются в подвижности простейших. Наносят по одной капле на первое стекло 3%-го раствора перекиси водорода, на второе — 1%-го ра­створа калия перманганата, на третье — 2%-го раствора формаль­дегида. Отмечают прекращение подвижности простейших только на первых трех стеклах. Вывод: этакридина лактат, перекиси водорода, калия перманганат и фор­мальдегид убивают простейших.

Тема: МЕТОДЫ ИЗВЛЕЧЕНИЯ ЯДОВИТЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ КОРМА И ПАТМАТЕРИАЛА

Цель занятия: освоить методы извлечения ядовитых веществ из корма и патматериала

Материадьное обеспечение: химическаая посуда, колба Кьельдаля, воду дистиллированная, ацетон, хлороформ, н-гексан и другие органические растворители, пробы корма и патматериал.

Ход работы:

Основные методы извлечения ядов — экстракция жид­костями, изоляция минерализацией и отгонкой с водя­ным паром.

В зависимости от растворимости ядовитых веществ для экстракции используют воду, ацетон, хлороформ, н-гексан и другие органические растворители.

Минерализацию осуществляют серной кислотой и пергидролем, соляной кислотой и калия хлоратом, а также методом сухого озоления.

Для минерализации серной кислотой и пергидролем берут 20—25 г патматериала в колбу Кьельдаля на 500 мл, заливают 10—12,5 мл пергидроля, тщательно смешивают и добавляют 6—7 мл концентрированной серной кислоты. После ослабления бурной реакции со­держимое колбы осторожно подогревают на газовой горелке или электроплите, периодически добавляя по 1—2 мл пергидроля до тех пор, пока оно не станет про­зрачным и не будет темнеть при дальнейшем нагрева­нии.

В полученном минерализате можно экспресс-мето­дом обнаружить ртуть, медь, цинк и мышьяк.

Для минерализации соляной кислотой и калия хло­ратом (бертолетовой солью) берут 20—25 г патматериа-ла в колбу Кьельдаля, заливают соляной кислотой, по­догревают и добавляют небольшими порциями калия хромат до тех пор, пока жидкость не станет прозрачной. В минерализате экспресс-методом можно обнаружить свинец и барий.

Отгонку с водяным паром применяют для извлечения синильной кислоты, формальдегида, фенола, некоторых ХОС, ФОС и других веществ.

Перегонный аппарат состоит из парообразователя (круглодонная колба со стеклянной трубкой в пробке), отгонной колбы с двумя трубками в пробке (одна идет почти до дна от парообразователя, другая — короткая соединена с холодильником), водяного холодильника и приемной колбы. Навеску измельченного материала помещают в отгонную колбу, подкисляют виннокамен­ной или щавелевой кислотой и подключают кипящий парообразователь, после чего начинают подогревать отгонную колбу. Дистиллят собирают в приемную кол­бу. В первых его порциях можно определять синильную кислоту, в последующих — другие вещества.

Для количественного определения берут точную на­веску материала и отгонку продолжают до тех пор, пока перестанет проявляться специфическая качественная реакция на ядовитое вещество. Полученный дистиллят объединяют, замеряют его объем и количественно опре­деляют содержание вещества.

ТЕМА: ОБНАРУЖЕНИЕ ГОССИПОЛА В КОРМАХ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ

Цель занятия: освоить метод определения госсипола в кормах растительного происхождения.

Материальное обеспечение: проба кормов, 0,2 %-ного водного раствора едкого натра, ацетон, стеклянные бусинки, петролейный эфир, 2 %-ного водного раствора серной кислоты, хлороформ.

Принцип метода: метод основан на извлечении из растительного материала в виде госсиполята натрия, очистке экстракта от коэкстрактивных веществ, переводе госсиполята натрия в свободный госсипол, извлечении его хлороформом, отгонке хлороформа с последующим анализом сухого остатка цветной реакцией на госсипол. Количественное определение проводят способом хроматографии в тонком слое.

Ход анализа

5 г измельченной и просеянной через сито пробы переносят в колбу на 250 мл, заливают 80 мл экстрагирующей смеси (70 мл а с 30 мл) и вносят стеклянные бусинки. Колбу закрывают и оставляют на 24 ч в вытяжном шкафу для настаивания при частом взбалтывании, после чего экстракт фильтруют через бумажный фильтр в делительную воронку. Содержимое колбы дважды промывают 15—20 мл экстрагирующей смеси и фильтруют. В делительную воронку вносят 20 мл петролейного эфира и перемешивают; после отстаивания нижний слой сливают в химический стакан, а верхний отбрасывают. Очистку нижнего слоя повторяют 3 раза, а при наличии травяной муки — 5—6 раз.

Очищенную экстракционную жидкость переносят в делительную воронку, куда добавляют 50 мл 2 %-ного водного раствора серной кислоты. Смесь выдерживают 15 мин, после чего госсипол трижды переэкстрагируют хлороформом в объеме 15, 10 и 10 мл. Хлороформенный экстракт фильтруют через бумажный фильтр в стеклянный низкий бюкс и ставят для испарения в вытяжной шкаф. Сухой остаток хранят в закрытом бюксе в темном сухом месте. Для исследования сухой остаток растворяют в 1 мл хлороформа.

Качественная реакция обнаружения госсипола .

0,1 мл хлороформенного раствора сухого остатка наносят на полоску хроматографической бумаги (10Х 4 см) с левой стороны, отступая от края 3 см. На расстоянии 3 см от пробы наносят 0,1 мл стандартного госсипола (5 мг госсипола растворяют в 50 мл хлороформа). После высыхания места нанесения растворов проявляют путем проводки через раствор проявителя (20 г флороглюцина, 100 мл этилового спирта, 10 мл концентрированной соляной кислоты). При появлении в исследуемой пробе красного или малинового пятна (как и в стандартном растворе госсипола) дают заключение о наличии госсипола в пробе. В дальнейшем проводят хроматографический анализ.

Тема: ОПРЕДЕЛЕНИЕ НАТРИЯ ХЛОРИДА АРГЕНТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ (МЕТОД МОРА)

Цель занятия: освоить определение натрия хлорида аргентометрическим методом.

Материадьное обеспечение: ацетон, н-гексан, петролейный эфир, бензол, хлороформ или их смеси, спирты, хлороформ, этилацетат, пластинки с тонким слоем сорбента, пробы корма и патматериал.

Принцип метода основан на извлечении натрия хлорида из корма или патматериала дистиллированной водой с последующим титрованием иона хлора раствором нитрата серебра в присутствии хромата калия как индика­тора. После связывания иона хлора серебром избыток нитрата серебра реагирует с хроматом калия, образуя хромат серебра красно-кирпичного цвета.

Ход определения : 10 г измельченного корма или патматериала (слизистой оболочки желудка или печени) помещают в мерную колбу на 100 мл, заливают до 3/4 объема водой, хорошо встряхивают и нагревают на водяной бане до 80 °С. Через 30 мин охлаждают до комнатной температуры, периодически встряхивая, до­водят водой до метки, встряхивают и фильтруют через складчатый бумажный фильтр в сухой стакан.

Если вытяжка окрашена интенсивно, можно взятую навеску подсушить на водяной бане, затем в тигле обуг­лить до легко распадающейся золы, количественно пе­ренести в мерную колбу на 100 мл и поступать далее, как описано выше.

20 мл фильтрата переносят в коническую колбу, приливают 1 мл 10 %-ного раствора калия хромата и титруют 0,1 н. раствором нитрата серебра до появле­ния неисчезающего кирпично-красного окрашивания.

Содержание натрия хлорида вычисляют по формуле:

х = а- 0,005844- в₁ • 100 ,

св

где X — содержание натрия хлорида, %; а — количество раствора нитрата серебра, пошедшее на титрование, мл; в — объем вытяжки, взятый для титрования, мл; в₁ — общий объем вытяжки, мл; с — навеска объекта, г; 0,005844 — количество NaCl (г), связывающегося 1 мл 0,1 н. раствора AgNO₃ .

Тема: ОПРЕДЕЛЕНИЕ АММИАКА В СОДЕРЖИМОМ РУБЦА МИКРОДИФФУЗИОННЫМ МЕТОДОМ

Цель занятия: освоить определение аммиака в содержимом рубца микродиффузионным методом.

Материадьное обеспечение: серная кислота 0,1н, насыщенный раствор поташа (кар­бонат калия), содержимое рубца, чашки, индикатор Ташира (основной раствор — 40 мл 0,1 %-ного спиртового раствора метилового красного смешивают с 10 мл 0,1 %-ного спиртового раствора метиленового синего; рабочий раствор — к 2 мл основ­ного раствора добавляют 2 мл спирта и 4 мл воды), 0,02 н. раствор едкого натра, 0,02 н. раствор серной кислоты.

Принцип метода основан на вытеснении аммиака ще­лочью из внешней камеры чашки Конвея и связывании его серной кислотой во внутренней камере. По количест­ву связанной кислоты рассчитывают концентрацию ам­миака.

Ход анализа . В одну половину внешней камеры чашки Конвея вносят 1—2 мл жидкого содержимого рубца (после фильтрации через капроновую ткань), во вторую — 1—2 мл насыщенного раствора поташа (кар­боната калия), а во внутреннюю камеру — 1 мл 0,1 н. раствора серной кислоты. В контрольную чашку вместо содержимого рубца вносят 1—2 мл дистиллиро­ванной воды. Чашки герметично закрывают стеклянными пластин­ками (парафиновые — подогретыми, стеклянные — с помощью вазелина), затем содержимое обеих половин внешней камеры смешивают легким покачиванием и ос­тавляют при комнатной температуре на 12 ч. Открывают чашку осторожно при помощи скальпе­ля, после чего во внутреннюю камеру вносят 1—2 капли индикатора Ташира (основной раствор — 40 мл 0,1 %-ного спиртового раствора метилового красного смешивают с 10 мл 0,1 %-ного спиртового раствора метиленового синего; рабочий раствор — к 2 мл основ­ного раствора добавляют 2 мл спирта и 4 мл воды) и титруют 0,02 н. раствором едкого натра. Индикатор Ташира в кислой среде имеет красную окраску, в щелоч­ной — зеленую.

Концентрацию аммиака рассчитывают по формуле:

(а - в) 0,34К100 ,

X= C

где а — количество едкого натра, пошедшее на титрование к контроль­ной пробе, мл; в — количество едкого натра, пошедшее на титрование в исследуемой пробе, мл; 0,34 — количество аммиака, связывающего­ся 1 мл 0,02 н. раствора серной кислоты, мг; К — титр раствора едкого натра; 100 — в расчете на 100 мл; С — количество содержимого руб­ца, внесенное в чашку, мл.

. Тема: ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРАТОВ И НИТРИТОВ В КОРМАХ

Цель занятия: освоить метод определения нитратов, нитритов в кормах.

Материадьное обеспечение: Приготовление реактива Грисса. Реак­тив Грисса состоит из двух растворов: 1) 0,5 г сульфани-ловой кислоты растворяют в 150 мл 12 %-ного раствора уксусной кислоты; 2) 0,1 г альфа-нафтиламина раство­ряют в 20 мл кипящей воды, фильтруют через бумажный фильтр и смешивают с 150 мл 12 %-ного раствора уксус­ной кислоты.

Растворы хранят на холоде отдельно в бутылках темного стекла. Перед применением их смешивают в равных объемах.

Прицип метода извлечение нитратов и нитритов из проб 2 %-ным раствором уксусной кислоты, на восста­новлении нитратов до нитритов цинковой пылью и взаи­модействии последних с реактивом Грисса.

Ход анализа . 10 г средней пробы измельченного корма заливают 200 мл 2 %-ного раствора уксусной кислоты и добавляют на кончике скальпеля порошок активированного угля. Смесь, периодически помешивая, настаивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего фильтруют через простой бумажный фильтр.

Для определения нитритов в пробирку с 10 мл филь­трата вносят 0,5 мл реактива Грисса, а в контрольную 0,5 мл 12 %-ного раствора уксусной кислоты. После тщательного смешивания при наличии нитритов появля­ется розовое окрашивание, интенсивность которого оп­ределяют с помощью ФЭК-М через 15 мин при зеленом светофильтре (длина волны 536 мкм) в кюветах с шири­ной рабочих граней 10 мм против контрольной пробы.

Концентрацию нитритов определяют по заранее под­готовленному калибровочному графику из стандартных растворов нитрита натрия, содержащих в 1 мл от 0,05 до 0,6 мкг NO₂ .

Для определения суммы нитратов и нитритов в про­бирки (опытную и контрольную) с 6 мл фильтрата вно­сят по 2 мл 10 %-ного раствора уксусной кислоты и на кончике скальпеля цинковую пыль (1 г порошка ме­таллического цинка тщательно в фарфоровой ступке смешивают с 10 г сульфата марганца). Пробирку встря­хивают в течение


8-09-2015, 19:32